首先我們來認(rèn)識什么是生物藥用蛋白制劑:
醫(yī)學(xué)上所說的生物藥用蛋白制劑是指用于預(yù)防、診斷和治療的蛋白質(zhì)類生物藥物,比如常用的胰島素、內(nèi)啡肽等,生物蛋白藥與小分子藥物相比,蛋白質(zhì)藥物具有高活性、特異性強(qiáng)、低毒性、容易被人體吸收、有利于臨床應(yīng)用等特點,在當(dāng)前老齡化社會及人們對身心健康的追求不斷加大的前提下,生物蛋白藥物具有廣闊的應(yīng)用前景。
中國藥典2020年版0901-0904對于注射用醫(yī)藥生物制品中的澄清度及不溶性微粒等均有明確檢測規(guī)定,生物蛋白制劑同樣需要檢測澄清度、不溶性微粒、可見異物(參考《中國藥典2020版》)。本文通過某生物醫(yī)藥公司藥用蛋白制劑的3個檢測指標(biāo),來進(jìn)行顆粒物案例分析。
二、檢測方法和結(jié)果
待檢樣品:某生物醫(yī)藥公司藥用蛋白制劑
檢測方法:依據(jù)《中國藥典2020版》0902澄清度檢查;0903不溶性微粒檢查;0904可見異物檢查。
檢查目的:比較不同批次樣品的澄清度
檢查方法:中國藥典0902第一法(目視法)
儀器設(shè)備:HN-200A澄清度檢查專用傘棚燈
測試流程:
1,樣品準(zhǔn)備:不同編號樣品(A、B、C、D)于冰箱中取出。
2,檢測過程:開啟HN-200A澄清度檢查傘棚燈電源,調(diào)節(jié)白色光源旋鈕,經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)照度計測量,將燈光強(qiáng)度調(diào)節(jié)至1000 lx±10%范圍,將待測樣品置于目視窗口,人眼水平觀察。
測試結(jié)果:
圖1顯示的是不同編號蛋白制劑樣品在HN-200A澄清度檢查專用傘棚燈下的實物照片,從中可以看到樣品A的澄清度最差,樣品D具有最佳的澄清度。
檢查目的:檢測藥用蛋白制劑中的不溶性微粒數(shù)量
檢查方法:中國藥典0903第二法(顯微計數(shù)法)
儀器設(shè)備:YH-MIP-0103顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀
測試流程:
1,樣品準(zhǔn)備:取0.45μm微孔濾膜 (直徑13 mm)置于過濾裝置上,將0.4 mL待測樣品倒入過濾裝置,進(jìn)行抽離過濾;過濾結(jié)束后,將濾膜轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)皿中,于低溫下烘干。
2,檢測過程:樣品濾膜取出后放入到Y(jié)H-MIP-0103顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀的測試臺上,調(diào)整測試參數(shù),于100倍的放大倍率下進(jìn)行聚焦掃描,測試結(jié)束后得到一張包含樣品不溶性微粒的大圖以及詳細(xì)的粒子粒徑和數(shù)量報告。
測試結(jié)果:
由于測試樣品體積為0.4 mL,故其測試結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)參照《中國藥典-0903不溶性微粒檢查》章節(jié)中小容量體積的標(biāo)準(zhǔn)。
表一:《中國藥典-0903不溶性微粒檢查》結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)
總量≥100 mL | 總量<100 mL | |||
尺寸 | ≥10 μm | ≥25 μm | ≥ 10 μm | ≥25 μm |
數(shù)量 | <12/ mL | <2/ mL | <3000/容器 | <300/容器 |
在此章節(jié)中,藥典規(guī)定:光阻法不適用于黏度過高和易析出結(jié)晶的制劑,也不適用于進(jìn)入傳感器時容易產(chǎn)生氣泡的注射劑。當(dāng)光阻法測定結(jié)果不符合規(guī)定或者供試品不適于光阻法測定時,應(yīng)采用顯微計數(shù)法進(jìn)行測定,并以顯微計數(shù)法的測定結(jié)果作為判定依據(jù)。
測試數(shù)據(jù):
表二:不同樣品的不同尺寸范圍微粒的數(shù)量及判定結(jié)果
樣品編號 | 粒子數(shù)N | 判定結(jié)果 | |
尺寸≥10μm | 尺寸≥25μm | ON/NG | |
A | 480 | 137 | ON |
B | 591 | 72 | ON |
C | 563 | 66 | ON |
D | 332 | 24 | ON |
以上A、B、C、D樣品不溶性微粒的測試結(jié)果表明該系列樣品中的不溶性微粒檢測符合《中國藥典-0903不溶性微粒檢測》章節(jié)中的檢測標(biāo)準(zhǔn)。從不同樣品的不溶性微粒的測試結(jié)果來看,可以看到樣品A中尺寸≥25 μm的粒子數(shù)量最多,而D樣品中尺寸≥25 μm的粒子數(shù)量最少,這與澄清度檢查章節(jié)中的測試結(jié)果具有很好的關(guān)聯(lián)性。
圖2為樣品A的顯微計數(shù)法不溶性微粒掃描的全局圖以及部分圖,從圖2 (b)、(c)中可以清晰地觀察到樣品制劑里面的不溶性微粒的形狀,表明該測試結(jié)果可以作為輔助手段鑒別不溶性微粒的來源。
全新一代YH-MIP-0205 Pro型全自動顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀在上一代儀器已有的技術(shù)優(yōu)勢下,進(jìn)行了全新升級,新的產(chǎn)品在原有自動掃描,自動測試,自動計數(shù)的功能上,新增加了自動過濾,自動干燥,自動上樣等功能,同時在原有超分辨算法的基礎(chǔ)上,加入AI智能算法,方便客戶更好的對不溶性的來源進(jìn)行分類和整理,實現(xiàn)真正的全自動檢查!
YH-MIP-0205 Pro型 全自動顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀,你值得擁有!
0904 可見異物檢查
檢查目的:觀察樣品制劑中的可見異物
檢查方法:中國藥典0904第一法(燈檢法)
儀器設(shè)備:Lu -200A可見異物檢查專用傘棚燈
測試流程:
1、儀器準(zhǔn)備:進(jìn)行可見異物檢測時應(yīng)避免引入可見異物,測試環(huán)境應(yīng)為無菌無塵環(huán)境。檢測前應(yīng)對容器外壁進(jìn)行擦拭,必要時將藥液轉(zhuǎn)移至潔凈透明的適宜容器中進(jìn)行觀察。
2、檢測過程:打開Lu -200A可見異物檢查專用傘棚燈,調(diào)節(jié)光源的光亮強(qiáng)度,配用照度計,將儀器的光強(qiáng)調(diào)節(jié)至1000 lx-1500 lx,將樣品置于遮光板邊緣處,手持容器頸部,輕輕反轉(zhuǎn)以避免產(chǎn)生氣泡,隨后進(jìn)行觀察。
測試結(jié)果:
可見異物系指存在于注射劑、眼用液體制劑和無菌原料藥中,在規(guī)定條件下目視可以觀測到的不溶性物質(zhì),其尺寸大于50 μm。下表為《中國藥典》0904章節(jié)中對于注射液無菌制劑中不溶性微粒數(shù)量的判定要求。
圖3為不同樣品在Lu-200A可見異物檢查專用傘棚燈下的實物圖,可以清晰地觀察到樣品溶液中存在可見異物,并且其中的可見異物數(shù)量超過藥典中的規(guī)定標(biāo)準(zhǔn),其中樣品A中的可見異物最多,這與該系列樣品的不溶性微粒測試結(jié)果相一致。
三、 檢測總結(jié)果
經(jīng)過對上述生物蛋白制劑微粒異物檢測分析可以得出以下結(jié)論:該生物蛋白質(zhì)劑經(jīng)過澄清度檢查、不溶性微粒檢查以及可見異物檢查之后,雖然該生物制劑的不溶性微粒檢查結(jié)果已經(jīng)達(dá)到了《中國藥典》中相關(guān)章節(jié)的檢測標(biāo)準(zhǔn),但是其可見異物檢查觀察到的粒子數(shù)量已超過《中國藥典》中的標(biāo)準(zhǔn)規(guī)范。
以上的測試結(jié)果表明HN-200A澄清度檢查專用傘棚燈、YH-MIP-0103顯微計數(shù)法不溶性微粒分析儀、Lu-200A可見異物檢查專用傘棚燈均可對生物藥用蛋白制劑中的微粒異物進(jìn)行有效的檢測,并且三項測試得到的測試結(jié)果具有很好的一致性,表明以上儀器均符合《中國藥典》中相關(guān)檢查的儀器要求。
電話
微信掃一掃